小鼠單核巨噬細(xì)胞需要怎樣的培養(yǎng)條件？

　　小鼠單核巨噬細(xì)胞是機(jī)體重要的免疫細(xì)胞，具有抗感染、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等重要作用。①抗感染：非特異性吞噬殺傷多種病原微生物，是機(jī)體非特異性免疫防御中的重要細(xì)胞。②提呈抗原、啟動(dòng)免疫應(yīng)答：在特異性免疫應(yīng)答中，絕大多數(shù)TD抗原（胸腺依賴(lài)抗原）都需經(jīng)巨噬細(xì)胞吞噬和加工處理，并與其表面的MHC分子形成抗原肽-MHC復(fù)合物，表達(dá)在細(xì)胞膜表面，提呈給T細(xì)胞。巨噬細(xì)胞表面有很多黏附分子，可與T細(xì)胞表面的協(xié)同刺激分子受體結(jié)合，產(chǎn)生協(xié)同刺激信號(hào)，誘導(dǎo)T細(xì)胞的活化，啟動(dòng)免疫應(yīng)答。③抗腫瘤：巨噬細(xì)胞被某些細(xì)胞因子如IFN-γ激活后能有效地殺傷腫瘤細(xì)胞，是參與免疫監(jiān)視的重要效應(yīng)細(xì)胞。④免疫調(diào)節(jié)：在特異性免疫應(yīng)答中，巨噬細(xì)胞可分泌釋放多種細(xì)胞因子，參與免疫調(diào)節(jié)。

　　

　　小鼠單核巨噬細(xì)胞具有較廣泛的造血活性，可刺激中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的增殖、分化和功能活性。主要用于腫瘤化療或放療引起的粒細(xì)胞減少。用于異體或自體骨髓移植，加速骨髓功能恢復(fù)，亦用于骨髓異常增生綜合征。

　　

　　小鼠單核巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)環(huán)境與一般貼壁細(xì)胞并無(wú)差異。即培養(yǎng)箱溫度為37℃，CO2濃度為5%。推薦的培養(yǎng)基為DMEM+10%的胎牛血清；實(shí)際上，經(jīng)研究者們實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)高糖型DMEM培養(yǎng)的RAW264.7細(xì)胞傳代后貼壁更快、細(xì)胞生長(zhǎng)速度更快。因此，推薦使用高糖型DMEM，F(xiàn)BS濃度為10%，作為RAW264.7細(xì)胞的培養(yǎng)基。

　　

　　關(guān)于RAW264.7細(xì)胞的傳代方法，ATCC推薦使用細(xì)胞刮刀。也可采用0.25%的胰酶消化或采用彎嘴吸管吹打等方法。采用細(xì)胞刮刀進(jìn)行傳代時(shí)，細(xì)胞能較大限度被收集起來(lái)，但會(huì)對(duì)細(xì)胞造成機(jī)械性損傷、影響細(xì)胞形態(tài)及貼壁時(shí)間等。采用胰酶消化時(shí)，由于RAW264.7細(xì)胞貼壁較牢，消化時(shí)間就較長(zhǎng)。但消化時(shí)間點(diǎn)不易把握，易消化過(guò)度，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)造成抑制。