C2C12 (小鼠成肌細(xì)胞)資源：提供完整溯源數(shù)據(jù)與培養(yǎng)指南

C2C12細(xì)胞是由D·Yaffe和O·Saxel建立的小鼠成肌細(xì)胞株的亞克隆；C2C12細(xì)胞分化很快，形成可伸縮的肌管并生成特征性的肌蛋白。用骨形成蛋白2（BMP-2）處理C2C12細(xì)胞，會(huì)導(dǎo)致C2C12細(xì)胞的分化途徑從成肌細(xì)胞轉(zhuǎn)換為成骨細(xì)胞。檢測表明，C2C12細(xì)胞肢骨發(fā)育畸形病毒（鼠痘）陰性。

別稱：C2c12;C2-C12;C12
種屬：小鼠
生長特性：貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)：成肌細(xì)胞樣
凍存條件：凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% DMSO
：溫度：液氮
培養(yǎng)方案A（默認(rèn)）：生長培養(yǎng)基：DMEM+10% FBS+1% P/S
：培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO?，5%, 溫度：37℃
推薦傳代比例：1:3-1:6
推薦換液頻率：2-3次/周
組織來源：骨骼肌；品系：C3H
細(xì)胞類型：自發(fā)永生化細(xì)胞
生物安全等級：BSL-1
保藏機(jī)構(gòu)：ATCC; CRL-1772 BCRC; 60083 BCRJ; 0058 DSMZ; ACC-565

注意事項(xiàng)

1. 該細(xì)胞貼壁松散，操作時(shí)請盡量輕柔。

2. 換液時(shí)需預(yù)熱培養(yǎng)基。

3. 收貨如有大塊脫落的細(xì)胞團(tuán)，為正常現(xiàn)象，請按照收貨注意事項(xiàng)處理。

常見問題

Q1:你們實(shí)驗(yàn)室有沒有驗(yàn)證過C2C12細(xì)胞成肌管實(shí)驗(yàn)？

測試過，普諾賽實(shí)驗(yàn)室分別用2%、4%、6%的馬血清誘導(dǎo)C2C12細(xì)胞3~7天，均出現(xiàn)明顯的肌管，其中6%馬血清誘導(dǎo)會(huì)更快出現(xiàn)肌管，使用的馬血清貨號：164215。實(shí)驗(yàn)存在很多影響因素，我們總結(jié)了下面幾點(diǎn)影響實(shí)驗(yàn)成敗的因素： (1)細(xì)胞傳代密度控制，C2C12細(xì)胞增殖較快，建議70~80%密度進(jìn)行傳代，每次都讓細(xì)胞長得過滿可能會(huì)影響后續(xù)誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)。 (2)馬血清品質(zhì)和濃度，不同品牌、批次的馬血清對C2C12誘導(dǎo)的效果差異明顯，馬血清誘導(dǎo)濃度一般在2~10% 。 (3)誘導(dǎo)前細(xì)胞密度控制，我們驗(yàn)證了細(xì)胞70%密度開始換馬血清進(jìn)行誘導(dǎo)，效果良好。 (4)器皿貼壁性，不同器皿貼壁性存在差異，為了確保細(xì)胞誘導(dǎo)過程中的貼壁狀態(tài)，建議使用貼壁性較好的器皿，或者使用0.1%明膠包被器皿使用。 (5)誘導(dǎo)周期，大部分情況下，C2C12細(xì)胞會(huì)在誘導(dǎo)3-7天出現(xiàn)明顯肌管，如果誘導(dǎo)8-10天還未出肌管，實(shí)驗(yàn)可能不太成功，需要重新安排實(shí)驗(yàn)。 (6)預(yù)防污染，細(xì)胞污染可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，比如細(xì)菌污染、真菌污染或者支原體污染。

Q2:C2C12細(xì)胞傳代比例和消化時(shí)間如何判斷？

建議傳代比例控制在1：3~1:4，這樣既能保證細(xì)胞有足夠的生長空間，又能避免細(xì)胞生長緩慢的問題。消化時(shí)間一般為1~2分鐘，但具體時(shí)間需要根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整。消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞損傷而漂浮過多。消化過程中應(yīng)密切觀察細(xì)胞的狀態(tài)，鏡下觀察細(xì)胞圓縮分散，細(xì)胞開始脫落即可終止消化。如果細(xì)胞生長較快，為了避免頻繁傳代，可以適當(dāng)降低傳代密度。

Q3:為什么不能讓C2C12細(xì)胞長得過滿或出現(xiàn)堆積？

C2C12細(xì)胞生長速度較快，如果不及時(shí)傳代，細(xì)胞會(huì)長滿培養(yǎng)瓶并開始堆積，甚至成片脫落。為了避免這種情況，建議在細(xì)胞密度達(dá)到70%~80%時(shí)進(jìn)行傳代。

Q4:C2C12細(xì)胞培養(yǎng)是否可以等到95%以上的密度再進(jìn)行傳代？

C2C12細(xì)胞生長較快，這個(gè)細(xì)胞正常培養(yǎng)的時(shí)候不建議細(xì)胞出現(xiàn)高度匯合的情況，95%的密度極容易長過飽和后漂浮，可能影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

C2C12細(xì)胞引用文獻(xiàn)

• Muscle-derived small extracellular vesicles induce liver fibrosis during overtraining(2025)

  期刊：Cell Metabolism

  DOI：10.1016/j.cmet.2024.12.005

  影響因子：27.7

  引用產(chǎn)品： 青霉素-鏈霉素溶液（雙抗），100×, C2C12 細(xì)胞, Hepa 1-6 細(xì)胞, LX-2 細(xì)胞

• Scalable production of muscle and adipose cell-laden microtissues using edible macroporous microcarriers for 3D printing of cultured fish fillets(2025)

  期刊：Nature Communications

  DOI：10.1038/s41467-025-57015-1

  影響因子：14.7

  引用產(chǎn)品： C2C12 細(xì)胞, Jurkat, Clone E6-1 細(xì)胞, 小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞完-全培養(yǎng)基, 小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞