細胞輔助試劑有哪些常見的種類

　　細胞輔助試劑在細胞培養、流式細胞術等實驗中發揮關鍵作用。
 

　　細胞輔助試劑常見種類及其功能如下：
 

　　一、細胞培養輔助試劑
 

　　培養基
 

　　功能：提供細胞生長所需的基礎營養物質(如氨基酸、維生素、無機鹽)和生長因子。
 

　　類型：DMEM、RPMI-1640、MEM等，根據細胞類型選擇不同配方。
 

　　補充物：胎牛血清(FBS)、人血清、抗生素(如青霉素-鏈霉素)、谷氨酰胺等，增強細胞生長穩定性。
 

　　細胞解離試劑
 

　　胰蛋白酶：分解細胞間蛋白質，使貼壁細胞脫落，用于傳代培養。
 

　　EDTA：螯合鈣、鎂離子，抑制胰蛋白酶活性，常與胰蛋白酶聯合使用(如0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA)。
 

　　膠原酶：用于消化組織塊，釋放單個細胞。
 

　　細胞凍存試劑
 

　　凍存液：含DMSO(二甲基亞砜)和血清，保護細胞在低溫下免受冰晶損傷。
 

　　程序降溫盒：控制凍存速度，提高細胞復蘇存活率。
 

　　細胞附著因子
 

　　多聚賴氨酸、層粘連蛋白、纖維連接蛋白：涂覆培養皿表面，促進細胞附著和鋪展，尤其適用于難貼壁細胞。
 

　　抗生素與抗污染試劑
 

　　青霉素-鏈霉素：防止細菌污染。
 

　　支原體祛除試劑：定期使用可預防支原體污染，維持細胞健康。
 

　　二、流式細胞術輔助試劑
 

　　紅細胞裂解液(溶血劑)
 

　　功能：利用低滲原理裂解血液或骨髓樣本中的紅細胞，富集白細胞。
 

　　特點：溫和裂解，保護白細胞膜完整性，減少碎片產生。
 

　　流式染色緩沖液
 

　　功能：稀釋抗體、洗滌細胞，維持細胞活力并減少非特異性結合。
 

　　成分：含BSA(牛血清白蛋白)和疊氮鈉，提供等滲環境。
 

　　固定劑與破膜劑
 

　　固定劑：如4%多聚甲醛，固定細胞形態，穩定表面抗原。
 

　　破膜劑：使抗體進入胞內檢測細胞因子或核內抗原(如轉錄因子)。
 

　　組合產品：溶血、破膜、染色一步完成，簡化操作流程。
 

　　細胞死活染料
 

　　膜不可透過性染料：如7-AAD、PI，僅進入死細胞，用于排除死細胞干擾。
 

　　可固定染料：如Zombie™系列，兼容固定和破膜步驟，提供更多熒光通道選擇。
 

　　Fc受體封閉劑
 

　　功能：阻斷免疫細胞(如B細胞、巨噬細胞)表面的Fc受體，減少非特異性抗體結合。
 

　　類型：抗小鼠CD16/CD32抗體、Human TruStain FcX™等。
 

　　細胞刺激劑與阻斷劑
 

　　刺激劑：如PMA(佛波酯)+離子霉素，激活細胞內信號通路，促進細胞因子分泌。
 

　　阻斷劑：如Brefeldin A(BFA)、莫能霉素，抑制高爾基體功能，阻斷細胞因子分泌，使其在胞內積累。